کاربرد تکنیک کروموژنیک در آزمایش اندوتوکسین های باکتریایی

تکنیک کروموژنیک یکی از سه تکنیکی است که شامل تکنیک لخته ژل و تکنیک کدورت سنجی برای تشخیص یا کمیت اندوتوکسین های باکتری های گرم منفی با استفاده از لیزات آمیبوسیت استخراج شده از خون آبی خرچنگ نعل اسبی (Limulus polyphemus یا Tachypleus tridentatus) است.می توان آن را به عنوان یک سنجش نقطه پایانی کروموژنیک یا یک سنجش جنبشی-کروموژنیک بر اساس اصل سنجش خاص به کار گرفته شده طبقه بندی کرد.

اصل واکنش این است که: لیزات آمبوسیت حاوی آبشاری از آنزیم های پروتئاز سرین (پروآنزیم) است که می تواند توسط اندوتوکسین های باکتریایی فعال شود.اندوتوکسین‌ها پروآنزیم‌ها را برای تولید آنزیم‌های فعال (که کواگولاز نامیده می‌شود) فعال می‌کنند، دومی شکافتن بستر بی‌رنگ را کاتالیز می‌کند و یک محصول زرد رنگ pNA را آزاد می‌کند.pNA آزاد شده را می توان به صورت فتومتریک در 405 نانومتر اندازه گیری کرد.و جذب با غلظت اندوتوکسین همبستگی مثبت دارد، سپس غلظت اندوتوکسین را می توان بر این اساس کمی سازی کرد.